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菌落总数测试片

发布时间:06月19日

详细说明

菌落总数测试片(食品大肠菌落测试片|水质菌落总数测试片)
产品说明 
1、原理及适用范围
  菌落总数是指样品经过处理,在一定条件下培养后所得1mL(g)检样或单位面积样品中所含菌落的总数,是最常用的微生物检测项目。菌落总数测试片(FilmplateTM Aerobic BB202)是一种预先制备好的一次性培养基产品,含有标准的营养培养基,冷水可溶性的吸水凝胶和脱氢酶指示剂氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在测试片上呈红色,这样可缩短计数时间和增强计数效果。本产品适合于各类食品及食品原料中菌落总数的测定,也可用于检测食品加工容器、操作台和其他设备表面的菌落总数。执行标准:食品安全国家标准 食品微生物学检验菌落总数测定(GB/T 4789.2-2010)。

2、操作方法
 2.1、样品处理:取样品25mL(g)放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液(或生理盐水)的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液,必要时用1mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液调节样品匀液pH至6.6~7.2。用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL,注入含有9mL稀释液的试管内,振摇后成为1:100的样品匀液,以此类推,做出1:1000等稀释度的样品匀液,每次换一支吸管。
 2.2、接种:一般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直接吸取原液进行检测。将菌落总数测试片(BB202)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置10s左右使培养基凝固,每个稀释度接种两片。同时做一片空白阴性对照。
 2.3、培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。一般食品培养温度为36℃±1℃,培养15~24h;水产品培养温度为30℃±1℃,培养48h。

3、结果判读
 细菌在测试片上生长后会显示红色斑点,选择菌落数适中(30~300个)的测试片进行计数,乘以稀释倍数后即为每毫升(或每克)样品中所含的细菌菌落总数。
                                                                                             
4、计数原则及报告方式
 4.1、若只有一个稀释度纸片上的菌落数在适宜计数范围内,计算两个纸片菌落数的平均值,再将平均值乘以相应稀释倍数,作为每毫升(或克)样品中菌落总数结果。
 4.2、若有两个连续稀释度的纸片菌落数在适宜计数范围内时,按式(1)计算: 
                                                                                                                   
  式中:
  N——样品中菌落数;
 ∑C——测试片上(含适宜范围菌落数的测试片)菌落数之和;
 n1——*一个适宜稀释度测试片数;
 n2——第二个适宜稀释度测试片数;
 d——稀释因子(*一稀释度)。
 示例:
                                                         

                                                                                           上述数据经“四舍五入”后,表示25000或2.5×104。
 4.3、若所有的稀释度菌落总数均大于300CFU,则对稀释度*高的测试片进行计数,其他测试片可记录为多不可计,结果按平均菌落数乘以*高稀释倍数计算。
 4.4、若所有的稀释度菌落总数均小于30CFU,则应按稀释度*低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
 4.5、若所有的稀释度(包括液体样品原液)均无菌落生长,则以小于1乘以*低稀释倍数计算。
 4.6、若所有稀释度的平均菌落数均不在30CFU~300CFU之间,其中一部分小于30CFU或大于300CFU,则以最接近30CFU或300CFU的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
 4.7、菌落总数的报告
 4.7.1、菌落总数在100CFU以内时,按“四舍五入”原则修约,采用两位有效数字报告。
 4.7.2、大于或等于100CFU时,第三位数字采用“四舍五入”原则修约后,取前两位数字,后面的0代替位数,也可用10的指数形式来表示,按“四舍五入”原则修约后,采用两位有效数字。
 4.7.3、若测试片上一片红色无法计数时,则报告多不可计。
 4.7.4、若空白对照上有菌落生长,则此次检测结果无效。
 4.7.5、称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/mL为单位报告。

5、表面取样方法
        加1mL灭菌磷酸缓冲液(或生理盐水)在测试片上,至少静置10S,使培养基凝固;提起上层膜,使中央滤纸部分贴到待测物表面,用手在外侧轻压;然后将上盖膜合上,置培养箱内培养。

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